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南京市计量监督检测院;北京林电伟业电子技术有限公司陈鸿飞获国家专利权

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龙图腾网获悉南京市计量监督检测院;北京林电伟业电子技术有限公司申请的专利一种表征过氧化氢灭菌性能的微生物标准物质制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121674385B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202610186892.1,技术领域涉及:C12N11/14;该发明授权一种表征过氧化氢灭菌性能的微生物标准物质制备方法是由陈鸿飞;朱文;惠文珊;崔馨文;高翔;倪茗;周宇新;祝天宇;李征设计研发完成,并于2026-02-10向国家知识产权局提交的专利申请。

一种表征过氧化氢灭菌性能的微生物标准物质制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种表征过氧化氢灭菌性能的微生物标准物质制备方法,属于生物检测技术领域,包括以下步骤:S1、原材料选择:包括指示微生物、载体、改性壳聚糖、改性介孔纳米二氧化硅和单宁酸;S2、制备复合保护液:将改性壳聚糖溶解于磷酸盐缓冲液中,加入单宁酸溶液;再加入改性介孔纳米二氧化硅;S3、制备芽孢保护悬液;S4、载体的接种与干燥;S5、包装与储存;本发明解决了现有过氧化氢灭菌性能评估中微生物标准物质量值不准、不稳、不可靠的问题。

本发明授权一种表征过氧化氢灭菌性能的微生物标准物质制备方法在权利要求书中公布了:1.一种表征过氧化氢灭菌性能的微生物标准物质制备方法,其特征在于,该方法用于制备每片芽孢含量为1.0×105至1.0×106CFU、回收率≥95%、相对扩展不确定度≤10%的微生物标准物质,包括以下步骤: S1、原材料选择:包括指示微生物、载体、改性壳聚糖、改性介孔纳米二氧化硅和单宁酸;其中,所述改性壳聚糖通过盐酸多巴胺改性羧甲基壳聚糖制得;所述改性介孔纳米二氧化硅通过氨基硅烷和苯硼酸对介孔纳米二氧化硅进行改性制得;所述指示微生物采用嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢,菌株编号为ATCC7953,芽孢纯度≥95%,芽孢悬液浓度为1.0×108至1.0×109CFUmL;所述载体采用316L不锈钢片,直径为6mm,厚度为0.5mm,表面粗糙度Ra≤0.8μm; S2、制备复合保护液:将改性壳聚糖溶解于pH值为6.5的磷酸盐缓冲液中,按照改性壳聚糖与单宁酸质量比为10:1的比例加入单宁酸溶液,室温搅拌30分钟;再加入改性介孔纳米二氧化硅,超声分散10分钟后继续搅拌2小时,得到复合保护液; S3、制备芽孢保护悬液:将芽孢悬液与复合保护液按照体积比1:9混合,温和振荡30分钟,使芽孢均匀分散于保护体系中,得到芽孢保护悬液; S4、载体的接种与干燥:将不锈钢载体置于超净工作台中,用微量移液器吸取10μL芽孢保护悬液滴加于载体中心,置于温度为25℃、相对湿度为40-50%的洁净环境中自然干燥4小时,干燥完成后转移至温度为4℃、相对湿度小于30%的干燥器中平衡24小时; S5、包装与储存:将干燥后的标准物质单片装入铝箔袋中,抽真空后热封,于2-8℃避光储存; 所述改性壳聚糖通过以下方法制备得到: A1、将羧甲基壳聚糖溶解于pH值为5.5的2-N-吗啉代乙磺酸缓冲液中得到溶液A,将盐酸多巴胺溶解于另外的上述缓冲液中得到盐酸多巴胺溶液,向溶液A中依次加入1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺,室温活化,在氮气保护下加入盐酸多巴胺溶液,室温避光搅拌反应,透析,冷冻干燥得到改性壳聚糖; 所述改性介孔纳米二氧化硅通过以下方法制备得到: B1、将十六烷基三甲基溴化铵溶解于去离子水中,加入质量分数为25%的氨水溶液,搅拌形成均匀胶束溶液,加入正硅酸乙酯,继续搅拌反应,转移至水热反应釜中,水热处理,自然冷却后离心,沉淀物依次用去离子水和无水乙醇洗涤,分散于无水乙醇中,加入质量分数为36-38%的浓盐酸,回流搅拌,离心收集,洗涤,真空干燥,得到介孔纳米二氧化硅; B2、将介孔纳米二氧化硅真空干燥后分散于无水甲苯中,超声分散,在氮气保护和磁力搅拌条件下加入3-氨丙基三乙氧基硅烷,升温回流反应,自然冷却后离心,依次用无水甲苯和无水乙醇洗涤,真空干燥,得到中间体; B3、将中间体分散于N,N-二甲基甲酰胺中,超声分散得到二氧化硅悬浮液,将4-羧基苯硼酸溶解于另外的N,N-二甲基甲酰胺中,再依次加入1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺,得到活化后的4-羧基苯硼酸溶液,在氮气保护下将活化后的4-羧基苯硼酸溶液加入二氧化硅悬浮液中,室温搅拌反应,离心收集,依次用N,N-二甲基甲酰胺、去离子水和无水乙醇洗涤,真空干燥,得到改性介孔纳米二氧化硅。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人南京市计量监督检测院;北京林电伟业电子技术有限公司,其通讯地址为:210046 江苏省南京市栖霞区马群大道(仙林大道)10号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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