天津合生生物科技有限公司冯露获国家专利权
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龙图腾网获悉天津合生生物科技有限公司申请的专利一种高效制备高纯度唾液酸乳糖-N-四糖a的重组大肠杆菌及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121472117B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202610012964.0,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种高效制备高纯度唾液酸乳糖-N-四糖a的重组大肠杆菌及其制备方法和应用是由冯露;刘斌;王磊;黄笛设计研发完成,并于2026-01-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高效制备高纯度唾液酸乳糖-N-四糖a的重组大肠杆菌及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种高效制备高纯度唾液酸乳糖‑N‑四糖a的重组大肠杆菌的构建方法及应用。本发明通过在大肠杆菌BL21DE3基因组中精准整合编码β‑1,3‑N‑乙酰葡萄糖胺基转移酶、β‑1,3‑半乳糖基转移酶和α‑2,3‑唾液酸糖基转移酶的基因,并敲除内源竞争性代谢基因,系统优化前体物质UDP‑乙酰葡萄糖胺、UDP‑半乳糖和CMP‑N‑乙酰神经氨酸的代谢通路,有效减少了包括乳糖‑N‑三糖、乳糖‑N‑四糖及3’‑唾液酸乳糖在内的非目标副产物生成,成功构建了能够高效生产高纯度唾液酸乳糖‑N‑四糖a的重组底盘菌株。利用所构建的工程菌发酵培养,可在保障生物安全性的前提下高效制备高纯度唾液酸乳糖‑N‑四糖a,适合于食品领域的生产需求。
本发明授权一种高效制备高纯度唾液酸乳糖-N-四糖a的重组大肠杆菌及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种高效制备高纯度唾液酸乳糖-N-四糖a的重组大肠杆菌,其特征在于:以大肠杆菌BL21DE3为底盘宿主,异源整合编码β-1,3-N-乙酰葡萄糖胺基转移酶基因NgolgtA、编码-1,3-半乳糖基转移酶基因SenlgtB和编码-2,3-唾液酸糖基转移酶基因PdST;编码-1,3--乙酰葡萄糖胺基转移酶NgolgtA的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示,编码-1,3-半乳糖基转移酶SenlgtB的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示,编码-2,3-唾液酸糖基转移酶PdST的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示; 敲除底盘宿主基因组中序列如ID:8181469所示的编码-半乳糖苷酶基因lacZ、序列如ID:8182212所示的编码UDP--乙酰葡萄糖胺2-差向异构酶基因wecB、序列如ID:8182577所示的编码UDP-葡萄糖脱氢酶基因ugd、序列如ID:8180191所示的编码葡萄糖胺-6-磷酸脱氨酶基因nagB、序列如ID:8180860所示的编码-乙酰神经氨酸醛缩酶基因nanA、序列如ID:8180858所示的编码-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-差向异构酶基因nanE、序列如ID:8180859所示的编码-乙酰神经氨酸渗透酶基因nanT和序列如ID:8180857所示的编码-乙酰甘露糖胺激酶基因nanK 过表达底盘宿主基因组中的序列如ID:945354所示的编码尿苷二磷酸葡萄糖4-差向异构酶的基因galE、序列如ID:8183713所示的编码葡萄糖胺-6-磷酸合成酶基因glmS、序列如ID:8179939所示的编码磷酸葡萄糖胺变位酶基因glmM、序列如ID:8183714所示的编码UDP--乙酰葡萄糖胺焦磷酸化酶基因glmU、序列如ID:4494209所示的编码UDP--乙酰葡萄糖胺2-差向异构酶基因neuC、序列如ID:4494211所示的编码-乙酰神经氨酸合酶基因neuB和序列如ID:4494210所示的编码CMP--乙酰神经氨酸合成酶基因neuA
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