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北京化工大学张瑛洧获国家专利权

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龙图腾网获悉北京化工大学申请的专利一种双熵驱动放大体系结合银纳米簇用于多重靶标microRNA检测的分析方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115094119B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210719430.3,技术领域涉及:C12Q1/682;该发明授权一种双熵驱动放大体系结合银纳米簇用于多重靶标microRNA检测的分析方法是由张瑛洧;王洪;刘子瑞;张晓伟;韩鑫;杨宏群;崔方丽设计研发完成,并于2022-06-23向国家知识产权局提交的专利申请。

一种双熵驱动放大体系结合银纳米簇用于多重靶标microRNA检测的分析方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种熵驱动放大体系结合银纳米簇用于多重靶标microRNA检测的分析方法,我们将靶标循环放大与信号产生设计在同一个体系中,基于富含鸟嘌呤G‑rich的AgNCs荧光增强和两个不发光的AgNCs结合形成较强荧光的纳米团簇二聚体dimer的两种AgNCs荧光增强现象,将其整合到熵驱动放大体系中的燃料链序列里,同时将两种熵驱动序列设计整合到一个复合结构内构建了双熵驱动复合底物,最终利用每种靶标催化其各自熵驱动的过程实现其对应AgNCs荧光信号的显著增强,从而实现对两种靶标microRNAs的单独和同时检测分析。该分析方法将多色的荧光AgNCs与熵驱动信号放大结合,能对多种microRNA实现快速、超灵敏同时检测。

本发明授权一种双熵驱动放大体系结合银纳米簇用于多重靶标microRNA检测的分析方法在权利要求书中公布了:1.一种双熵驱动放大体系结合银纳米簇用于多重靶标microRNA检测的分析方法,其特征在于,步骤为: 1用PB缓冲液将一定体积一定浓度的F141、L21和F21分别与AgNO3溶液混合,剧烈振荡5s,置于4℃的冰水浴中避光孵育1h; 2将步骤1中孵育后的溶液中加入NaBH4溶液,剧烈振荡20s,置于4℃的冰水浴里避光孵育过夜,制备F141-AgNCsL21-AgNCsF21-AgNCs单体; 3将L141、S141、Linker或L21-AgNCs、S21、Linker等体积等浓度混合,在PB和CH3COONa缓冲液中退火至25℃,反应2h形成三链杂交DNA底物; 4将L141、S141、Linker、L21-AgNCs、S21等体积等浓度混合,在PB和CH3COONa缓冲液中退火至25℃,反应2h形成五链杂交DNA底物; 5单独检测加燃料链:在步骤3得到的三链DNA底物中加入燃料链F141-AgNCs或F21-AgNCs,充分混合均匀;稀释后分到10个PCR管中; 6同时检测加燃料链:在步骤4得到的五链DNA底物中加入加燃料链F141-AgNCs和F21-AgNCs,充分混合均匀;稀释后分到10个PCR管中; 7单独检测:向步骤5的每个PCR管中加入不同浓度的miRNA-141或miRNA-21,对照组加入buffer,25℃下反应30min,进行荧光测试,得到miRNA-141或miRNA-21的特异性检测结果; 8同时检测:向步骤6的每个PCR管中加入不同浓度的miRNA-141和miRNA-21,对照组加入buffer,25℃下反应30min,进行荧光测试,得到miRNA-141和miRNA-21的特异性检测结果; 其中,L141序列为5’-CCATCTTTACCAGACAGTGTTAGGGACATCGTATCGTCAGACTCAGGGGTGGGTGGGTGGGT-3’; S141序列为5’-TCCCTAACACTGTCTGGTA-3’; Linker序列为5’-GATACTTCCACTGCGATTACCTGAGTCTGACGATACGATG-3’; F141序列为5’-CCCACCCACCCACCCACTGAGTCTGACGATACGATGTCCCTAACACTGTCTGGTA-3’; miRNA-141序列为5’-UAACACUGUCUGGUAAAGAUGG-3’; L21序列为5’-CCCCCTTAATCCCCCAAGTAATCGCAGTGGAAGTATCGGGATCAACATCAGTCTGATAAGCTA-3’; S21序列为5’-TCAGACTGATGTTGATCCC-3’; F21序列为5’-TCAGACTGATGTTGATCCCGATACTTCCACTGCGATTACAACCCCCTAATTCCCC-3’; miRNA-21序列为5’-UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-3’。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人北京化工大学,其通讯地址为:100029 北京市朝阳区北三环东路15号北京化工大学材料科学与工程学院;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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