南京医科大学沈链链获国家专利权
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龙图腾网获悉南京医科大学申请的专利一种基于荧光强度的单克隆细胞株筛选方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121558713B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202610101301.6,技术领域涉及:G01N21/64;该发明授权一种基于荧光强度的单克隆细胞株筛选方法是由沈链链;吴炜;丁竞竞;管强东;熊建平;王丽设计研发完成,并于2026-01-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于荧光强度的单克隆细胞株筛选方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于荧光强度的单克隆细胞株筛选方法,该方法步骤如下:确定一种细胞系,该细胞系的细胞稳定转染荧光蛋白;选定微孔板并设定基准孔,分离稳定转染荧光蛋白的细胞入微孔板,其中基准孔入多个细胞、其余孔仅入1个细胞;在除基准孔以外的其余孔中筛选出有且仅有1个细胞的单细胞孔;筛选出能长出克隆团的克隆团孔;克隆团孔中的细胞各自消化后转移至新孔培养;筛选出荧光筛选孔;筛选出分裂增殖孔;确定分裂增殖孔内的细胞为筛选出的单克隆细胞株。本发明提供的单克隆细胞株筛选方法能够筛选出荧光强度强且能以正常速度增殖的单克隆细胞株,与荧光显微镜观察、成像相比,方便快捷,也减少了人眼比较荧光强度可能产生的误差。
本发明授权一种基于荧光强度的单克隆细胞株筛选方法在权利要求书中公布了:1.一种基于荧光强度的单克隆细胞株筛选方法,其特征在于:该方法步骤如下: S1、确定一种细胞系,该细胞系的细胞稳定转染荧光蛋白; S2、选定用于单细胞分离的微孔板并设定基准孔,分离步骤S1中稳定转染荧光蛋白的细胞入微孔板,其中基准孔入多个细胞、其余孔仅入1个细胞; S3、步骤S2中的稳定转染荧光蛋白的细胞分离入微孔板当天,采用微孔板成像系统在除基准孔以外的其余孔中筛选出有且仅有1个细胞的单细胞孔; S4、对单细胞孔内的细胞培养若干天后,采用微孔板成像系统在单细胞孔中筛选出能长出克隆团的克隆团孔; S5、每个克隆团孔中的细胞各自消化后转移至新的微孔板上一一对应的新孔培养; S6、细胞转移至新孔后,采用微孔板成像系统筛选出细胞平均荧光强度前30%~前50%的新孔作为荧光筛选孔; S7、对荧光筛选孔内的细胞培养若干天后,采用微孔板成像系统筛选出细胞能以正常速度增殖至步骤S6中的荧光筛选孔内的细胞数量的4~8倍的荧光筛选孔作为分裂增殖孔; S8、确定分裂增殖孔内的细胞为筛选出的单克隆细胞株。
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